骨髓細胞培養基

【產品名稱】

通用名稱:骨髓細胞培養基

商品名稱:骨髓細胞培養基

英文名稱:Bone marrow Medium
 

【包裝規格】

5ml/瓶,24瓶/盒
 

【預期用途】

本產品為細胞標本前處理試劑,用於骨髓細胞增殖培養,不具備對細胞的選擇、誘導、分化功能,培養後的骨髓細胞用於體外診斷,該產品不用於治療性用途。
 

【主要組成成分】

RPMI1640、青黴素、鏈黴素、小牛血清等。
 

【儲存條件及有效期】

    4-8℃保存, 有效期1個月; -5℃以下保存, 有效期12個月,可穩定至保質期末。
 

【使用方法】

一、標本接種

1、采集標本

無菌抽取3-5ml骨髓,注入肝素鈉抗凝管,使抗凝劑與標本充分混勻,防止凝固。

2、標本處理

① 在無菌操作台裏,取2ml骨髓入無菌離心管中,加入RPMI-1640液5ml洗脫。

② 1500轉離心10分鍾,去上清。再加入RPMI-1640液5ml,混勻。

③ 重複洗脫共三次,最後一次去上清,加入RPMI-1640液至洗脫前體積,混勻。

3、接種

用注射器抽取離心管中的細胞液,參考患者白細胞計數量按梯度用7號針頭垂直滴細胞液至骨髓細胞培養基內(約為8滴、12滴、15滴)

二、培養

置37℃±0.5℃恒溫箱中培養約48小時(可在中間時段輕搖一次,使細胞獲得充分營養)。

三、細胞學處理

1、培養完成前45分鍾,加入秋水仙素(20ug/ml)至終濃度為0.2-0.8ug/ml,繼續培養45分鍾。

2、將細胞液吸入10ml離心管中,1500轉離心10分鍾。去上清,留約0.5ml細胞液。

3、低滲:加入0.075M KCl 8ml,用吸管吹打約30次,37℃水浴30分鍾。

4、預固定:加入1.5ml左右的固定劑(甲醇∶冰醋酸=3∶1),輕混勻。37℃水浴10分鍾。1500轉,離心10分鍾,去上清,約留0.5ml上清液。

5、固定:加入8ml左右的固定劑,輕混勻。1500轉,離心10分鍾後去上清,約留0.5ml上清液。

6、重複固定:加入8ml左右的固定劑,輕混勻,1500轉,離心10分鍾,去上清,約留0.5ml上清液。去上清液時,視管底細胞量加入適當固定液,輕輕混勻製成細胞懸液。

7、滴片:將細胞懸液滴於用冰水預冷的載玻片上,高度約為30cm±,每張載玻片上滴2滴。

8、放入75℃烤箱中烤片3小時。

四、染色體顯帶

將經烤片處理的玻片放入37℃的0.25%胰酶溶液中(PH=7.2-7.4)消化1分至1分半鍾(根據顯帶效果調整胰酶作用時間)再用0.85%NaCl溶液(預溫至37℃)漂洗兩次,在預溫至37℃的Giemsa溶液中染色,自來水衝洗幹淨,晾幹後,即可閱片。

【檢驗結果】細胞形態好,分裂細胞多,細胞核型大,染色體清晰。
 

【檢驗方法的局限性】


【產品性能指標】參考骨髓細胞培養基臨床免疫檢驗各項目質量控製指標。


【注意事項】

1. 細胞密度以3×106/ml左右為宜;

2.當遇到已經過多次放療、化療和藥物治療的病人,重複兩次標本都缺乏有絲分裂相,可能是病人本身原因造成的。

3.實驗操作的溫度最好控製在26℃以上,濕度保持在70%左右為最佳。

4.短期內可放4-8℃保存,若長期儲存,應放-5℃以下保存,不可反複凍融。

5. 遠距離運送的標本必須在24h內投入培養;

6.本產品隻用於體外診斷,操作過程應避免汙染;操作人員在檢驗時應做好防護,預防疾病傳播。

AG8生產的骨髓培養基為目前國內唯一獲得市場準入資質的產品。
產品備案號:粵穂械備 20150166

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