淋巴細胞培養基

【產品名稱】 
 通用名稱: 淋巴細胞培養基
 英文名稱: Lymphocyte Medium


【包裝規格】 5ml/瓶,24瓶/盒
【預期用途】 本產品為細胞標本前處理試劑,用於淋巴細胞增殖培養,培養後的淋巴細胞用於體外診斷,該產品不用於治療性用途。
【主要成分】 RPMI1640、PHA、肝素、小牛血清等
【儲存條件及有效期】 保質期8個月。(-20℃)冷凍保存,可穩定至保存期末。

【使用方法】

1.采血: 用10:2肝素(10%)溫潤無菌注射器抽取外周血2ml(注意:消毒時需脫碘)

2.種血: 將注射器搓捏,使血樣混勻,在無菌條件下,用7#針頭垂直種血(外周血28-32滴,臍帶血22-24滴)至淋巴細胞培養基內。

3.培養: 將培養瓶放入37℃恒溫箱中培養68-72小時,培養期間注意觀察培養基有無凝血、溶血或長菌的現象,可每天將培養基搖一搖,以便細胞可獲得充分的營養,一般情況下可不搖。

4.製片:

  加秋水仙素:在培養完成前2-3小時,加入濃度為20ug/ml的秋水仙素2-3小滴(7#針頭豎滴)後,繼續培養2-3小時。
離心:將培養液用吸管吸至離心管中(10ml離心管)2000轉/分X10分鍾,棄上清,留沉澱。
低滲:加入已預溫至37℃的0.075mol/L氯化鉀溶液約8ml,用吸管充分打勻,放入37℃水浴箱中,溫育30分鍾。
預固定:向離心管中加入現配的預溫至37℃的甲醇、冰醋酸固定液(3:1)1ml左右,輕輕混勻,置室溫下5分鍾,2000轉/分X10分鍾,棄上清,留沉澱。
固定:沿管壁緩慢加入現配的預溫至37℃的新配固定液約8ml輕輕混勻,然後2000轉/分離心10分鍾。加入固定液再次固定。棄上清,用固定液將沉澱調成細胞懸液(不宜太濃,一般加固定液至0.5ml)在冰片上滴片,每張片上滴2滴。
烤片:立即放入75℃烤箱中烤片3小時。

5.顯帶:先將玻片放在預溫至37℃的0.25%胰酶溶液中(PH=7.2-7.4)消化1分左右,每次作用時間並不完全相同。可先試一張片子,再根據顯帶效果調整胰酶作用時間,再放在預溫至37℃的0.85%NACl溶液中漂洗兩次,在預溫至37℃的吉姆薩染液中染色10分鍾,自來水衝洗幹淨,用吹風機吹幹,即可閱片。

【注意事項】
1:采集的外周血若立即接種則無需加肝素抗凝,如需保存標本,應加肝素抗凝。
2:采集的外周血在冰箱4℃保存,保存期不能超過一周。

 公司對產品進行重新注冊,包裝全新改版,包裝尺寸變小,減小保存空間,利於存放。
 產品名由“淋巴細胞培養液”變更為“淋巴細胞培養基”(粵穂械備20150158號)

 

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